Влияние озонотерапии на иммутет: новый подход к изучению явления

И.В. Кошелева, А.В. Симонова

Исследовалось влияние системной озонотерапии на иммунные показатели у больных с различными хроническими дерматозами. При этом для анализа был применен принципиально новый методический подход, заключавшийся в определении уровня различных естественных аутоантител в сыворотке крова Под наблюдением находилось 103 пациента с красным плоским лишаем, псориазом, ограниченной склеродермией и ангнитами кожи. Все пациенты получали системную озонотерапию. Исследование различных параметров естественного аутоиммунитета выявивило наличие активации или супрессии гуморального звена иммунитета, аутоиммунного компонента воспаления 14 тканевых нарушений. После лечения отмечен значительный положительный эффект озонотерапии, выразившийся в регрессе клинических проявлений Дерматозов, удлинении периода ремиссии и иммуномодулирующем эффекте озонотерапии.

В лечебных целях озон в виде кислородно-озоновой смеси применяется уже около 150 лет, т.е. практически сразу после того, как он был получен в лабораторных условиях и описаны его физико-химические свойства. Благодаря своей высокой окислительной способности озон Длительное время использовался в медицине в качестве природного антибиотика и антисептика. Эти его свойства продолжают активно применяться в различных областях практической медицины; при этом применяются методики наружной обработки кожных покровов кислородно-озоновой смесью с высоким содержанием озона.

Однако, C развитием медицинской озонотерапевтической аппаратуры, отвечающей требованиям современной медицины, на передний план вышли методики озонотерапии, связанные с системным введением озонокислородной смеси в организм. Стало очевидно, что на метаболизм в человеческом организме озон оказывает многокомпонентное регуляторное воздействие, важнейшим фактором которого является влияние на систему иммунитета.

К настоящему времени накоплены убедительные клинические данные, касающиеся иммунотропного действия озонотерапии, но до сих пор изучалось в основном воздействие озонотерапии на отдельные звенья иммунитета. Определено, что иммунотропное действие озонотерапии подразделяется на прямое через иммунокомпетентные клетки опосредованное через различные механизмы регуляции гомеостаза (улучшение микроциркуляции, ликвидация тканевой гипоксии, стимуляция антиоксидантной системы организма и др.). Кроме того, известно, что влияние озонотерапии на иммунитет дозозависимо: малые дозы озона стимулируют основные звенья иммунитета, большие наоборот, оказывают супрессивное воздействие

Исследователи и клиницисты в разных странах независимо друг от друга сообщали о следующих влияниях озонотерапии на иммунитет: а) нормализация показателей клеточного иммунитета; б) модулирующее влияние на гуморальное звено иммунитета: нормализация исходно измененных уровней иммуноглобулинов А, М и G, а также циркулирующих иммунных комплексов в сыворотке крови; в) активация фагоцитарного звена иммунитета: поглотительной и переваривающей способности нейтрофилов и моноцитов, нормализация образования активных форм кислорода фагоцитами. Таким образом, озонотерапия оказывает очевидное иммуномодулирующее воздействие на основные звенья иммунитета.

Однако при лечении больных ных хроническими кожными заболеваниями, в развитии которых определяющее значение имеют различные нарушения иммунитета, даже при очевидном эффекте от лечения иногда не выявляется значительных изменений в исходном иммунном статусе. Это убедительно свидетельствует о том, что, к сожалению, лечение в этом случае было скорее симптоматическим и длительность ремиссии вряд ли будет большой. С другой стороны, имеющиеся в распоряжении стандартные современные методы оценки иммунного статуса не предоставляют возможности адекватно оценить состояние иммунной системы. С помощью имеющихся методик оценки иммунного статуса организма сложно также оценить системность поражения организма при дерматозах. Все эти характеристики можно получить при определении состояния естественного аутоиммунитета.

Естественный аутоиммунитет это совокупность антител к собственным белкам-антигенам организма. Согласно теории, высказанной впервые И.И. Мечниковым в конце ХІХ в. В нормальных, физиологических концентрациях это регуляторные молекулы клеточных процессов, выполняющие в организме три основные функции: во-первых, они «работают мусорщиками», удаляющими не только чужеродные агенты, но и собственные апоптотически измененные клетки; во-вторых, являются противововоспалительными агентами (т.е., «гасят» провоспалительные цитокины), в-третьих, выполняют ферментативные функции (в частности, участвуют в синтезе перекиси водорода, обладают протеолитической, ДНК-азной активностью). Аутоантитела составляют примерно 20-30% от всех иммуноглобулинов G сыворотки крови (остальные это антитела к чужеродным антигенам). Увеличение или уменьшение их количества свидетельствует о наличии изменений в том органе или системе, которые они представляют. Аутоантитела являются как бы зеркальным отражением белков-антигенов, характерных для определенных органов и систем и свидетельствуют об их состоянии. Общая совокупность аутоантител дает картинку состояния организма в целом в этом состоит так называемая концепция «Иммункулуса» сложно организованной системы из многих тысяч естественных аутоантител, отражающей особенности функционально-метаболического состояния органов и тканей и участвующей в регуляции общего гомеостаза.

Таким образом, определение содержания в сыворотке крови аутоантител того или иного вида дает возможность оценить состояние масштаб поражения организма и перспективы проводимой терапии.

Материалы и метод

В нашем исследовании мы определяли различные параметры естественного аутоиммунитета, выявившие наличие активации или супрессии гуморального звена иммунитета, аутоиммунного компонента воспаления и тканевых нарушений. Было обследовано 103 пациента с различными заболеваниями кожи псориазом, красным плоским лишаем, ограниченной склеродермией и ангиитами кожи. При всех этих заболеваниях в основе патогенеза лежат те или иные иммунные нарушения.

При иммунологическом обследовании у пациентов определяли параметры, до сих пор не входившие в стандартное иммунологическое обследование, а именно содержание:

1) АТ к двуспиральной (нативной) ДНК (АТ к ДНК), характеризующее выраженность процессов (запрограммированной гибели клеток) в организме; апоптоза

2) АТ к бета-2-гликопротеину (AT beta - 2 - г - n ) характеризующее наличие и выраженность антифосфолипидного синдрома (АФС);

3) АТ к бета-2-гликопротеин-связывающим антителам («антитела к антителам» АТ к В-2-г-п АТ) по изменению их количества можно судить 0 Длительности, патологического процесса,; динамике и стадии

4) ревматоидного фактора (РФ) Fc-фрагмента иммуноглобулинов, участвующего в подавлении синтеза иммуноглобулинов любой специфичности и являющегося индикатором силы и остроты воспалительного процесса;

5) АТ к коллагену (AT к K) и фибриллярному белку миозину ( AT к М.), характеризущее повреждение еждение соединительной ткани;

6) АТ к гамма-интерферону (ATH*phi) и к его рецепторам ( AT р- рам ИФ) повышение их уровня является маркером активного воспалительного процесса;

7) АТ к эндотелиальному ферменту NO-синтаза (AT к NOs) к антигенам эндотелия сосудов (ANCA), к белкам мембран тромбоцитов (АТ к антигенам TM-001-15, TrM-008-10, TrM-015- 12) повышение их уровней указывает на наличие ангиопатии и тромбоцитопатии различного генеза, в том числе аутоиммунного и может являться признаком воспалительного поражения сосудов кожи.

Определение уровня антител-маркеров в сыворотке крови к различным белкам организма проводилось методом иммуноферментного анализа до начала лечения и через 3-5 дней после окончания озонотерапии. Все пациенты получали системную озонотерапию в виде внутривенных вливаний озонированного физиологического раствора. При этой методике сначала производится обогащение физиологического раствора B медицинской озонаторной установке кислородно-озоновой газовой смесью, а затем полученный озонированный раствор с концентрацией озона 2 мг/л вводится пациенту внутривенно капельно. Всего в течение курса лечения больные получали 7-10 процедур.

Результаты.

Содержание аутоантител B сыворотке крови больных C вышеупомянутыми хроническими дерматозами свидетельствовало о наличии иммунных нарушений (активации или супрессии иммунитета). У большинства обследованных пациентов с разными дерматозами имелись иммунологические проявления активного воспалительного процесса (повышение содержания АТ к ДНК и/или к гамма-интерферону, повышенный уровень РФ и признаки АФС). В среднем, у 69% обследованных больных отмечались признаки системной активации иммунитета и примерно у 31% больных признаки иммуносупрессии по гуморальному типу.

При анализе изменений иммунных показателей при отдельных дерматозах выявлены следующие особенности.

У большинства пациентов с красным плоским лишаем (74%) было отмечено достоверное (р<0,05, р<0,01) повышение уровня аутоантител к продуктам апоптоза и признаки активного АФС. Эти изменения убедительно свидетельствуют о наличии у большинства больных этим дерматозом системной активации иммунитета, выраженного аутоиммунного компонента воспаления соединительной ткани. признаков поражения

В группе больных псориазом признаки иммуноактивации в целом были выражены в меньшей степени и у меньшего количества больных (54%). У 46% обследованных больных, наоборот, отмечались признаки иммуносупрессии по гуморальному типу. Кроме того, у больных псориазом изменения содержания антител к коллагену и миозину не достигли статистической достоверности. Эти данные заставляют сделать предположение о наличии в патогенезе псориаза аутоиммунного компонента, но менее выраженного, чем при красном плоском лишае.

В группе больных склеродермией у большинства обследованных пациентов (78%) прежде всего обращало внимание значительное превышение показателей АФС и уровня антител к коллагену и миозину по сравнению с контрольной группой, что вполне согласуется C существующими взглядами на патогенез этого дерматоза (коллагеноз). А уровни ревматоидного фактора и АТ к гамма-интерферону и его рецепторам были у этих больных наименее значимы, что также согласуется с фактом, что при склеродермии клинически воспалительные изменения на коже по сравнению с другими дерматозами выражены минимально, а в клинической картине превалируют признаки дистрофии. В целом, выраженность и острота активации иммунного воспаления в этой группе больных была сравнима с таковыми в групие больных псориазом и менее выражена, чем у больных с красным плоским лишаем. Признаки умеренно выраженной иммуносупрессии были отмечены у 22% больных.

В группе больных с ангинтами кожи у 69% больных выявлены признаки иммуноактивации (повышение уровня АТ к ДНК, наличие признаков АФС и умеренное повышение РФ). У 31% больных показатели были в пределах нормальных значений или незначительно снижены.

Таким образом, после проведения исследования параметров естественного аутоиммунитета у больных с различными дерматозами стало очевидно, что следует ввести в клиническую практику дифференцированный подход к озонотерапии. Схему и дозы проводимой озонотерапии у разных больных необходимо варьировать в зависимости от исходных показателей уровня аутоантител: при наличии исходно высокого уровня иммуноактивации, активного воспалительного процесса дозы и схемы озонотерапии должны быть более высокими и интенсивными, а при наличии признаков иммуносупрессии более низкими и короткими. В соответствии с данными рекомендациями и были проведены курсы лечения.

После лечения отмечен значительный положительный эффект озонотерапия, выразившийся в регрессе клинических проявлений дерматозов, удлинении периода ремиссии и иммуномодулирующем эффекте озонотерапии.

У больных красным плоским лишаем после проведенной озонотерапии исходно повышенные иммунные показатели, отражающие активацию иммунитета, наличие АФС, активность воспалительного процесса, повреждение соединительной ткани достоверно снижались, либо имели тенденцию к снижению. При разделении пациентов на подгруппы с исходно высокими и исходно нормальными или низкими показателями аутоиммунитета обнаружено, что при исходно высоких показателях практически во всех случаях выявлено достоверное значительное (от 25 до 70% по разным показателям) снижение уровня аутоантител; относительно стабильными оставались лишь признаки тромбоцитопатии. Исходно низкие показатели повышались до нормальных значений, а исходно нормальные сохранялись в тех же диапазонах, что указывает на иммуномодулирующий эффект озонотерапии.

В группе больных псориазом у пациентов с исходными признаками иммуноактивации снижение показателей было значительно менее выраженным, чем в группе больных с КПЛ. Признаки тромбоцитопатии и сосудистой патологии у больных псориазом также оставались наименее чувствительными K проведению озонотерапии, что заставляет предположить необходимость включения сосудистых препаратов ангиопротекторов и дезагрегантов в традиционные схемы лечения КПЛ и псориаза. В целом, у пациентов с вульгарным псориазом и длительным (более 10 лет) течением кожного процесса озонотерапия оказалась менее эффективной и обладала менее выраженным иммуномодулирующим эффектом; кроме того, у части пациентов некоторые показатели после озонотерапии, наоборот, повышались, что коррелировало с нестойкостью ремиссии у данной категории больных. У пациентов с экссудативной формой псориаза исходно повышенные показатели демонстрировали значительно более выраженную положительную динамику.

В группе больных склеродермией после проведения озонотерапии были достигнуты наиболее убедительные клинические результаты и стойкая ремиссия. После лечения нормализовались все исходно измененные показатели; особенно значительные положительные изменения отмечались среди больных C исходно повышенными показателями. Кроме того, в отличие от больных с красным плоским лишаем и псориазом, после озонотерапии компенсировались признаки аутоиммунной васкуло- и тромбопатии.

В группе больных ангиитами кожи на фоне хорошего клинического эффекта (заживление язвенных дефектов, регресс геморрагий) у больных с исходно повышенными показателями аутоиммунитета сохранялись лабораторные признаки воспалительного процесса, повышенного апоптоза и АФС. Это может быть связано с выраженным повреждением эндотелия сосудов и тромбопатией, характерных для данной патологии. Тем не менее, исходно повышенные иммунные показатели демонстрировали тенденцию к снижению. Исходно низкие показатели после лечения имели тенденцию к повышению, иногда превышая нормальные. Это может указывать на необходимость пересмотра стандартной схемы озонотерапии при ангиитах в сторону снижения ее интенсивности у больных с признаками иммуносупрессии (что клинически чаще всего коррелирует с вялотекущим кожным процессом без выраженных признаков острого воспаления на коже) и противоречит традиционным представлениям о нежелательном назначении активной системной озонотерапии больным в острой фазе заболевания.

Таким образом, на основании проведенного исследования можно сделать следующие выводы:
1. Использованная в исследовании методология, основанная на определении содержания аутоантител в сыворотке крови, отражает различные звенья иммунопатогенеза дерматозов наличие активации или супрессии гуморального звена иммунитета и является принципиально новым подходом к изучению влияния озонотерапии на систему иммунитета. Определение естественного аутоиммунитета является высокоинформативным методом оценки эффективности озонотерапии, экономичным и простым в исполнении и может быть рекомендован для использования в широкой клинической практике.

2. После проведенной озонотерапии у обследованных больных было отмечено достоверное снижение или тенденция к снижению исходно повышенных иммунных показателей, нормализация исходно сниженных показателей; исходно нормальные показатели естественного аутоиммунитета после лечения не претерпели существенных изменений. У больных с КПЛ, псориазом и ангиитами кожи выявлены стойкие признаки ангио и тромбопатии, сохраняющиеся и после курса озонотерапии,

3. Полученные данные о динамике содержания аутоантител в сыворотке крови B процессе лечения позволяют осуществить принципиально новый подход к традиционной озонотерапии при дерматозах: оптимизировать схемы и дозы в зависимости от наличия активации или супрессии иммунитета.